細胞培養的一般過程 

    一 、準備工作
     準備工作對開展細胞培養異常重要 ，工作量也較大 ，應給予足夠的重視 ，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗 、幹燥與消毒 ，培養基與其他試劑的配製 、分裝及滅菌 ，無菌室或超淨台的清潔與消毒 ，培養箱及其他儀器的檢查與調試 ，具體內容可參閱有關文獻 。
    二 、取材
    在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定） ，經過一定的處理（如消化分散細胞 、分離等）後接入培養器血中 ，這一過程稱為取材 。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程 。機體取出的組織細胞的首次培養稱為原代培養 。
    理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用於培養 ，實際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個體的組織容易培養 ，分化程度低的組織比分化高的容易培養 ，腫瘤組織比正常組織容易培養 。取材後應立即處理 ，盡快培養 ，因故不能馬上培養時 ，可將組織塊切成黃豆般大的小塊 ，置4℃的培養液中保存 。取組織時應嚴格保持無菌 ，同時也要避免接觸其他的有害物質 。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌 ，為減少汙染可用抗菌素處理 。
  由組織並分離分散細胞的方法可參閱有關文獻 。
    三 、培養
    將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養 。如係組織塊培養 ，則直接將組織塊接入培養器皿底部 ，幾個小時後組織塊可貼牢在底部 ，再加入培養基 。如係細胞培養 ，一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數 ，按要求以一定的量（以每毫升細胞數表示）接入培養器皿並直接加入培養基 。細胞進入培養器皿後，立即放入培養箱中 ，使細胞盡早進入生長狀態 。
    正在培養中的細胞應每隔一定時間觀察一次 ，觀察的內容包括細胞是否生長良好 ，形態是否正常 ，有無汙染 ，培養基的PH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示） ，此外對培養溫度和CO₂濃度也要定時檢查 。
    一般原代培養進入培養後有一段潛伏期（數小時到數十天不等） ，在潛伏期細胞一般不分裂 ，但可貼壁和遊走 。過了潛伏期後細胞進入旺盛的分裂生長期 。細胞長滿瓶底後要進行傳代培養 ，將一瓶中的細胞消化懸浮後分至兩到三瓶繼續培養 。每傳代一次稱為“一代” 。二倍體細胞一般隻能傳幾十代 ，而轉化細胞係或細胞株則可無限地傳代下去 。轉化細胞可能具有惡性性質 ，也可能僅有不死性（Immortality）而無惡性 。
  培養正在生長中的細胞是進行各種生物醫學實驗的良好材料 。
    四 、凍存及複蘇
    為了保存細胞 ，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株 ，要將細胞凍存 。凍存的溫度一般用液氮的溫度—－196℃ ，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞碸或甘油）的培養基 ，以一定的冷卻速度凍存 ，最終保存於液氮中 。在極低的溫度下 ，細胞保存的時間幾乎是無限的 。
    複蘇一般采用快融方法 ，即從液氮中取出凍存管後 ，立即放入37℃水中 ，使之在一分鍾內迅速融解 。然後將細胞轉入培養器皿中進行培養 。
    凍存過程中保護劑的選用 、細胞密度 、降溫速度及複蘇時溫度 、融化速度等都對細胞活力有影響 。