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細胞增殖實驗中 ,細胞鋪板數量是以什麽為標準來定 ?

Q:細胞增殖實驗(細胞毒性實驗)中 ,
細胞鋪板數量是以什麽為標準來定 ?之前感覺是以檢測當日細胞覆蓋96孔孔底80~100%為宜 。現在似乎感覺有點問題 。迷茫中……貼壁細胞是絕對不能超過1萬個每孔嗎 ?有的細胞個頭特別的小 ,鋪下去72小時候後看著很少 。還有些細胞特別的慢 ,72小時候也是很少 。我用Alarm blue方法檢測,經常 無藥的空白對照孔的熒光強度比給藥(低濃度)的還要低 。而且中間還經常跳動 ,有的超出趨勢(按照趨勢應該有的強度)的高或者低 。


A:消化每瓶細胞 ,如重懸體積為8ml ,你可以計數每ml的量 ,假如5*10^5個/ml ,那麽一瓶就是4*10^6個細胞 ,鋪96孔板時就可以換算成長滿一個孔的量 ,即4*10^6/25(瓶子底麵積)*0.32(96孔板每孔麵積) ,做MTT實驗需要72h ,再按照倍增時間 ,如24h ,再換算成你種板時候的量 ,要除以2^3 。不知道這樣表述明白了麽

細胞凍存

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