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細胞凍存液比例是多少 ?

細胞凍存液比例 :

 

凍存液配製 :
20%胎牛血清、10%DMSO 、70%1640培養液;或90%血清 、10%DMSO ,更可防止細胞內冰晶形成 。
DMSO在4℃時對細胞無明顯毒性 ,分子量小 、溶解度大 、易透過細胞膜,降低細胞外未結冰溶液中溶質濃度 ,使細胞免受高濃度溶質的損傷,細胞內水分也不會過分外滲 ,避免了細胞過分脫水皺縮 ;DMSO與水分子結合 ,可使冰點下降 ,減少細胞內冰晶的形成 ,從而減少冰晶損傷.

FBS :DMSO 不是必須9 :1, 這種方式太奢侈了 ,FBS很貴 ,且一般務必要 ,除非是貴重的淋巴細胞等 。 一般用完全培養基(含10-20%FBS)與DMSO按一定比例凍存,例如9 :1  或95 :5凍存 ,有一定偏差也是可以的 。

另外 ,還有一些是無血清培養的細胞 ,也不能添加血清 ,這時就用無血清培養基(根據細胞特性定製的培養基)加入5-10%的DMSO來凍存 。

總之 ,不是必須FBS:DMSO=9 :1, 那是很古老的文獻資料裏常提到的凍存方案 。

細胞類型和細胞株個體特性 。不同細胞有其最佳凍存條件 ,不盡相同 ,需參考說明書和文獻 。如果發現細胞凍存後狀態不佳 ,需要自己摸條件 ,或考慮汙染和培養條件問題 。

 細胞凍存液


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