細胞凍存之後複蘇掛掉 ，小秋認為有幾種可能的解釋 ：

（1）細胞因未妥善儲存而死亡（液氮容器存在問題 ，細胞凍存液存在問題等） 。

（2）介質中缺少一些添加劑 。例如，您是否添加了雙倍量的胎牛血清 ？您的細胞是否需要任何不常用的特殊添加劑 ？

（3）為了複活 ，細胞的密度太低 。為避免這種情況 ，請使用較小的燒瓶/平板 。

如果你能提供一些你想要複活的細胞類型的細節 ，那將是很有用的 。我的答案是指常見的哺乳動物細胞培養物 ，但如果你正在研究細菌 ，昆蟲細胞等 ，還有其他可能的解釋 。

除上述要點外 ：

你可能過快地將細胞凍存 - 直接在液氮中（極不可能 ，但可能） 。理想情況下 ，你應該將它們在含有異丙醇的冷凍箱中在-80℃下冷凍過夜 ，然後轉移到液氮中 。

或者你把它們解凍太慢 。與流行的看法相反 ，你必須在室溫下解凍細胞保存細胞1分鍾 ，然後在水浴中孵育 ，直到你看到冷凍介質變成液體 。不要在冰上融化 。

此外 ，當冷凍保存時 ，重要的是細胞具有高活力 ，並且處於指數生長期 ，而不是處於平台期 。

還有更多的可能 ，是你沒有使用HAKATA無血清細胞凍存液 ！

這是一款無血清即用型細胞凍存液 ，最大的特點就是無需程序降溫盒及稀釋 ，無需分步降溫 ，直接使用 ！

可在 - 80℃長期保存幹細胞 、腫瘤細胞和常規細胞 。冷凍細胞時 ，用HAKATA細胞凍存液懸浮處於對數生長期的細胞 ，不需預冷 ，直接- 80℃冷凍保存 ，也可用液氮快速冷凍細胞 ； 

複蘇時用恒溫箱或者水浴鍋快速複蘇細胞即可 。不僅操作方便 ，更能提供穩定的凍存效果 ，獲得更好的細胞活力 。