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胎牛血清(FBS)知多少

胎牛血清

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很複雜的混合物 ,其組成成份雖大部分已知 ,但還有一部分尚不清楚 ,且血清組成及含量常隨供血動物的性別 、年齡 、生理條件和營養條件不同而異 。血清中含有各種血漿蛋白 、多肽 、脂肪 、碳水化合物 、生長因子 、激素 、無機物等 ,這些物質對促進細胞生長或抑製生長活性是達到生理平衡的 。

胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛 。胎牛血清是品質最高的 ,因為胎牛還未接觸外界 ,血清中所含的抗體 、補體等對細胞有害的成分最少 。

胎牛血清要求 :

1 、性狀 、外觀 :淺黃色澄清 、無溶血 、無異物稍粘稠液體 。

2 、蛋白質含量 :3.5%~5.0%( w/v)

3 、血紅蛋白含量 :≤ 0.02%( w/v)

4、無菌檢驗 :陰性

5 、支原體檢驗 :陰性

6 、細菌內毒素 :≤5(EU/ml)

7 、牛腹瀉病毒 :陰性

8 、大腸杆菌噬菌體 :陰性

9 、支持細胞增殖 :(Sp2/0-Ag14) 生長曲線 (接種濃度)最大增殖濃度 ≥2.5×106個/ml ,細胞倍增時間 :≤15h ,克隆率 :≥85%

胎牛血清功能

牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基 ,含有豐富的細胞生長必需的營養成份 ,常用於動物細胞的體外培養 ,具有極為重要的功能 。

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物 ,以及主要的低分子營養物 。

2. 提供結合蛋白 ,能識別維生素 、脂類 、金屬和其他激素等 ,能結合或調變它們所結合的物質活力 。

3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合 ,起到解毒作用 。

4.是細胞貼壁 、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

5.起酸堿度緩衝液作用 。

6.提供蛋白酶抑製劑,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活 ,保護細胞不受傷害 。

胎牛血清的評估標準

是最常用的血清添加劑,因為它富含生長因子、蛋白和大分子 。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅 ,但許多細胞係未必適用 ,並且存在費用較高和生長較慢等缺點 。那麽 ,研究人員在評估FBS的質量時 ,需要考慮哪些標準呢 ?

對於細胞培養而言 ,血清的重要性不言而喻 。它含有蛋白 、生長因子 、氨基酸 、脂類 、碳水化合物 、維生素及其他組分 ,可以促進貼壁或懸浮細胞的生長和維持 。胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加劑 ,因為它富含生長因子 、蛋白和大分子 。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅 ,但許多細胞係未必適用 ,並且存在費用較高和生長較慢等缺點 。

目前 ,市場上存在著不同等級的FBS 。由於FBS關乎細胞活力和實驗重複性等重要的參數 ,故在質量方麵是絕對不能含糊的 。若質量不穩定 ,則有可能導致實驗失敗 。那麽 ,研究人員在評估FBS的質量時,需要考慮哪些標準呢 ?

1.可追溯性

對於科學家而言 ,最大的風險也許是FBS的純度大打折扣 ,這可能導致細胞培養實驗的效果不佳 。許多FBS的賣家與多個產地簽訂短期供應協議來采集原材料 ,以便降低成本 。他們將這些產品混合 ,稀釋不同來源的影響 。然而 ,最終結果就是質量不穩定 ,產品供應和價格出現波動 。

針對這一問題 ,國際血清行業協會(ISIA)實施了供應鏈可追溯性的行業標準 ,這對確保FBS各個批次的質量 、安全性和重複性起了關鍵作用 。一些公司提供化學分析 ,說明原產國的統計概率 。也許最好的方法是追溯到動物 ,以確保產品的來源 。

FBS的供應商是否在整個供應鏈中都保留原產地的可追溯記錄 ?他們是否持有文件 ,支持各個階段的處理 、運輸和商業交易 ?他們能否展示獨特來源的可追溯性 ,以確保重複性和低病毒風險 ?在考慮購買FBS時 ,這都是你需要考慮的問題 。

地域性風險評估(GBR)是定性評估一個國家或地區的動物感染疾病(如瘋牛病)的可能性 。這種方法依賴世界動物衛生組織(OIE)的監控係統 ,將每個國家或地區的瘋牛病風險進行分類 。OIE評估各個國家的獸醫服務 、疾病診斷能力 、覺察症狀能力及其他因素 ,以避免瘋牛病的傳播 。

新西蘭和澳大利亞都獲得了GBR 1級 ,這意味著它們目前是沒有瘋牛病和口蹄疫的 。這兩個國家都是出了名的病毒風險最低的國家 。由於環境受到保護 ,以及嚴格的農業法規和入境要求 ,再加上它們都是島國 ,動物們不太可能受到其他地區疾病的影響 。這對於那些敏感的細胞係和實驗而言特別有用 。對科學家來說 ,好處是花在重複實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少 。

2.質量

對血清而言 ,產品質量尤為關鍵 。由美國食品和藥品管理局(FDA)執行的cGMP規範建立了完整體係 ,以確保製造過程和工廠的正確設計 、監控和控製 。在購買血清時 ,你最好選擇遵從cGMP規範的供應商 ,以便降低產品混合和標簽錯誤的風險 。

確保各批次一致性還涉及其他因素 ,包括牛群環境 、食物來源以及質量控製檢測程序 。正確采集血清,才能保證它天然的促進生長特性 ,並實現FBS產品的出色表現 。當然 ,這些資料收集起來可不容易 ,那麽你可以依靠國際公認機構(如FDA、USDA 、AQIS等行業協會)的認證 ,來尋找理想的供應商 。

3.價格

有時 ,FBS的價格會大幅波動 ,這取決於許多因素 。作為肉類行業的副產品 ,FBS的生產在本質上會受到天氣和食物供應 、經濟條件和牛群規模等各種因素的影響 。如果病毒不定期再來搗亂一下,那麽牛的數量必然下降 ,FBS的供應也勢必減少 。此外 ,由於幹旱導致奶牛飼養費用較高 ,農民可能會將牛賣掉或屠宰 ,導致牛群數量下降 。

值得一提的是 ,全世界對FBS的需求還在不斷增加 。每年 ,全球大約生產600,000 L的FBS ,其中cGMP等級的不足200,000 L ,而後者正是大多數工業生產公司的要求 。隨著大型製藥公司的需求上升 ,FBS的價格也在持續上漲 。此時 ,找到一家可以提供同批次FBS的供應商是十分必要的 ,這既確保了產品供應 ,也在一定程度上避免價格波動 。

4.檢測

定期的產品檢測當然也不能少 。大家應注意產品的供應商是否定期進行生化 、激素 、病毒和功能方麵的檢測 ,包括檢測細菌 、病毒及其他微生物是否存在 ,以確保產品經過全麵鑒定 。質量控製檢測也應當開展 ,以確保血清產品始終符合規定並合乎規格 。

總的來說 ,FBS及其他血清有可能大大影響細胞培養工作的質量和重複性 。因此 ,在購買過程中 ,尊龍凱時有必要對FBS的身世 、質量以及質檢過程做到心中有數 ,而不僅僅被價格所左右 ,這樣才能改善實驗結果 ,節省寶貴時間


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